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De ascendencia rusa, David William Duchovny creció bajo la influencia de su padre, el publicista Amram Duchovny y su madre, la profesora de literatura Margaret Duchovny.

Se graduó en literatura inglesa por la Universidad de Princeton y amplió sus estudios en la Universidad de Yale. Más adelante decidió abandonar estos estudios e inició su trayectoria interpretativa actuando en obras teatrales en Nueva York.

A lo largo de la década de los 90 realizó varias apariciones en distintas películas y series como en la ya mítica serie de televisión Twin Peaks interpretando al agente travesti Denis/Denisse. Pero su verdadero salto a la fama fue con el papel que le ha hecho famoso alrededor del mundo: el agente especial Fox Mulder en la serie Expediente X (The X files) dirigida por Chris Carter (papel que le valió para ser nominado para un premio Emmy y le hizo ganar un Globo de Oro).

Aunque las malas lenguas afirmaban que Duchovny se quedaría encasillado en el papel del "siniestro" agente, el actor supo salir a flote con otros muchos proyectos en la gran pantalla como Kalifornia, Evolution o Delitos Menores (de la cual también fue su director).

Entre sus últimos trabajos podemos encontrar: Ellas y ellos (2006), una comedia co-protagonizada por Julianne Moore y The Secret, un remake cinematográfico de una película japonesa de 1999 dirigida por Vincent Pérez .

Bien es verdad que con todas estas incursiones cinematográficas Duchovny pasó ciertamente desapercibido, pero este año 2008 ha vuelto a dar que hablar con su regreso a la pequeña pantalla y la serie Californication, en la cual interpreta a un mujeriego e insolente escritor que se encuentra en medio de una crisis literaria y personal.

En el verano del 2008 Duchovny se volvió a vestir de agente del FBI y junto a su compañera de reparto durante más de 10 años, Gillian Anderson, protagonizaron la última secuela de la serie que les llevó a ambos a la fama: The X Files: I want to believe.

Aún y su fama de mujeriego (mantuvo romances con Winona Ryder, Sheryl Lee, Perrey Reeves y Lisa Loeb) finalmente contrajo matrimonio con la actriz Tea Leoni (con la que ha tenido dos hijos), aunque después de 11 años de matrimonio anunciaron su separación.